实验室常用的湿热灭菌法,实验室消毒灭菌的方法

湿热灭菌法是最常用的灭菌法，效果较好。在同一温度下湿热灭菌的效力比干热灭菌的效力强。常用的湿热灭菌法有巴氏消毒法、煮沸消毒法、流通蒸汽消毒法、间歇灭菌法及高压蒸汽灭菌法。在实际工作中所采用的不同消毒、灭菌法是根据不同的要求、不同的对象而采取的。

1）巴氏消毒法：由巴斯德首创的利用热力杀死液体中的病原菌和一般杂菌，同时又不致严重损害消毒物的质量的方法。常用于乳制品的消毒。

具体的消毒方法有两种：61.1℃～62.8℃消毒30分钟；71.7℃消毒15～30秒。目前使用后一种方法较多。

2）煮沸消毒法：煮沸5分钟，可杀灭所有的细菌繁殖体，一般消毒以煮沸10分钟为宜。但杀死芽孢则需1至数小时。如果在水中加入1% Na2CO3则可提高沸点（105℃），增强杀灭芽孢的作用，同时又可防止金属器械生锈。如在水中加入2%～5%石炭酸，则10～15分钟后即可破坏芽孢，所以许多医疗器械，如手术刀、剪、镊子、胶管、玻璃注射器等，常用煮沸消毒。

3）流通蒸汽灭菌法：利用常压下100℃的水蒸气进行消毒。用阿诺灭菌器或普通蒸笼进行。因在正常大气压下，故温度不会超过100℃。普通细菌的繁殖体15～30分钟可杀死，而芽孢常不易被消灭。

4）间歇灭菌法：利用反复多次的流通蒸汽加热，杀灭所有微生物，包括芽孢的方法。有些物质不能加热至100℃以上，为了消灭其中的细菌芽孢，需用间歇灭菌法。方法是用阿诺灭菌器或用蒸笼加热100℃维持30分钟，每天进行一次，连续3天。第一次加热后，细菌的繁殖体即被杀灭，而芽孢还存活。为了使芽孢发育成繁殖体，将被灭菌的物品取出，放在室温或37℃温箱内过夜，第二天再加热一次，则可杀死由芽孢生成的繁殖体。为了达到彻底灭菌，照上法再进行第三次加热，这样所有的芽孢将被杀灭。

5）高压蒸汽灭菌法：高压蒸汽灭菌法是目前最常用的有效方法。其原理是在排除冷空气的密闭条件下，蒸汽压力越大则容器内的温度越高，杀菌力越强。当蒸汽压达到0.103MPa/cm2即15磅时，温度可达121.3℃，在此温度下延续20分钟即可杀死所有细菌的芽孢。