平板上不长菌落的原因「关于接菌后平板上无菌生长的几点原因解析」
一、菌种原因:
1、 菌种没有进行充分活化
当我们拿到一株菌的时候,该菌种往往是处于一个保藏状态的,这就需要我们通过合适的培养基来逐代扩大培养,得到活力旺盛的菌株,所以充分活化的目的就是要让菌种逐渐适应培养环境,从而在平板上快速的长起来。
2、 菌种老化
菌种如果经过连续的频繁的传代达十几次甚至几十次,就会造成菌种老化,出现生长缓慢甚至不生长的情况。
3、 野生
在做技术服务的时候,经常有客户反馈平板上不长菌,究其原因,可以从以下三个方面去分析。
一、菌种原因:
1、 菌种没有进行充分活化
当我们拿到一株菌的时候,该菌种往往是处于一个保藏状态的,这就需要我们通过合适的培养基来逐代扩大培养,得到活力旺盛的菌株,所以充分活化的目的就是要让菌种逐渐适应培养环境,从而在平板上快速的长起来。
2、 菌种老化
菌种如果经过连续的频繁的传代达十几次甚至几十次,就会造成菌种老化,出现生长缓慢甚至不生长的情况。
3、 野生菌种
相比于标准菌株,有一些野生分离的菌种本身比较脆弱,对营养要求比较高,对外界不良环境也比较敏感,难以在普通的平板上长起来,往往需要加入特殊的营养物质。
4、购买的商品化菌株
有一些商品化的菌株,如益生菌、菌肥、可食用真菌等,本身进行过基因改造,不能进行连续传代扩大培养,因此在平板上难以长出来。
5、样品中的菌
有的样品中本身含菌量就较少,如水样、供试液等,接种量低造成平板上无菌生长。还有的样品中含有一些抑菌成分,会杀死样品中的菌,导致平板上无菌生长。
二、人员操作不当原因
1、 在实验操作过程中失误,特别是在稀释菌液过程中少接或者错接菌。
2、 培养基配置过程中称量错误,加入添加剂比例错误等。
3、 容器未洗刷干净,残留的抑菌成分导致菌不生长。
4、 过度灭菌,有很多培养基成分不耐高温,过度灭菌会导致成分失效。
5、 调PH值错误,不同温度下培养基的PH值也会不一样,未正确的调配PH值,也会导致菌不生长。
6、 未放置合适的培养条件,根据不同菌对氧气的需求程度,可以分为需氧、厌氧、微需氧培养等。根据不同菌对温度的需求,又可以在25度、30度、35度、42度、56度等不同温度下培养。
三、培养基及添加剂原因
1、 培养基及添加剂超过有效期或者临近有限期,营养成分存在一定程度的失效导致菌不生长。
2、 特殊培养基及添加剂未正确存放,未遮光、冷藏、严格密封保存等导致失效。
3、 培养基PH值发生改变,有一些特殊的成品培养基PH值随时间会存在一定程度的改变,在使用前需要对PH值重新进行调整,否则也会导致菌不生长。
4、 成品培养基本身质量不好,如原材料纯度不高、含有抑菌成分、原材料之间配比错误等都会导致成品培养基不合格。
5、 培养基及添加剂营养不够或者不适合培养某类菌种。有一些菌种本身营养要求比较特殊,需要添加某些特殊营养后才能生长。
经一段时间培养后其中一块平板上的各个划线区域均未见微生物生长最可能的原因?
大概有四种原因:
你的样品里没有目的菌种,这是最可能的原因,建议重新实验。培养基的抗生素用错了,菌落无法生长。培养条件不对,细菌生长适宜温度是37℃。培养板上培养基配置问题,没有足够的营养成分。
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